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MethyPrecise® 探针法甲基化检测 qPCR 预混液（2× Methy-qPCR Mix）（JSR-E-206 JSR-E-207）

产品货号	包装规格	价格
JSR-E-206	100次	580
JSR-E-207	500次	2680

关键词

表观遗传系列 MethyPrecise®

甲基化

探针法

所属分类

表观遗传系列 MethyPrecise®

PCR系列

简石生物 MethyPrecise® 探针法甲基化检测 qPCR 预混液（JSR-E-206系列）

产品概述

本产品为MethyPrecise® 探针法甲基化检测 qPCR 预混液（2× Methy-qPCR Mix，货号JSR-E-206系列），专为DNA甲基化检测优化，由基因工程热启动酶与专用缓冲液配制而成，提升亚硫酸盐模板适配性、25%~70% GC兼容性、尿嘧啶耐受性与3'端错配识别能力，检测灵敏度与特异性优异。产品为2×即用型预混液，仅需加入引物、探针、模板；配套高低两种ROX参比染料，适配主流qPCR仪器。扩增曲线线性好，定量准确、重复性高，适用于甲基化位点检测、SNP分型等实验，推荐搭配JSR530亚硫酸盐修饰试剂盒使用。提供100次、500次两种规格，-25℃~-15℃保存，仅用于科研实验用途。

产品特点

专为甲基化检测优化，基因工程改造热启动酶搭配专用缓冲液，显著提升甲基化场景下多重靶标检测性能；
宽GC含量兼容，适配25%~70% GC含量的模板，覆盖不同基因区域甲基化检测需求；
强耐受性设计，对亚硫酸盐转化产物、尿嘧啶修饰模板适配性优异，降低模板抑制影响；
3'端错配碱基识别能力强，可精准区分甲基化与非甲基化位点，检测特异性高；
高灵敏度低拷贝检出，多重靶标检测灵敏度优异，低丰度甲基化模板也可稳定检出；
扩增性能优异，扩增曲线线性度好，靶基因定量准确，实验结果重复性高；
2×即用型预混液，仅需额外加入引物、探针、模板，简化操作步骤，减少加样误差；
配套双浓度ROX参比染料，高低两种规格可选，适配主流不同品牌qPCR仪器，无需额外采购；
反应体系灵活可调，5~25μL体系可按比例缩放，适配不同实验通量与样本量需求；
严格质量控制，提供一年质量保证，性能稳定可靠，仅用于科研实验，不用于临床诊断。

性能验证数据

采用甲基化qPCR检测体系，对A、B两个基因位点进行扩增测试，每个模板投入量设置2个平行重复，与同类型竞品Y进行对比，验证本产品的扩增效率、线性度与检测灵敏度。

A基因扩增性能对比

品牌	转化投入量	Cq 1	Cq 2	Cq平均值（Avg）
同类型竞品Y	1ng	36.10	36.95	36.53
10ng	33.34	34.09	33.71
20ng	32.54	32.27	32.41
100ng	29.46	29.54	29.50
200ng	28.36	28.69	28.53
300ng	27.95	27.63	27.79
500ng	27.10	27.01	27.05
简石JSR-E-206	1ng	36.02	39.18	37.60
10ng	32.72	32.41	32.56
20ng	31.85	32.02	31.94
100ng	28.91	28.76	28.83
200ng	27.90	27.86	27.88
300ng	27.17	27.37	27.27
500ng	26.31	26.36	26.34

B基因扩增性能对比

品牌	转化投入量	Cq 1	Cq 2	Cq平均值（Avg）
同类型竞品Y	1ng	37.09	35.68	36.39
10ng	32.73	33.28	33.01
20ng	31.53	31.31	31.42
100ng	28.69	28.85	28.77
200ng	27.89	27.70	27.79
300ng	27.01	26.91	26.96
500ng	26.52	26.17	26.35
简石JSR-E-206	1ng	36.32	36.39	36.36
10ng	32.38	31.62	32.00
20ng	30.74	30.89	30.81
100ng	27.81	27.74	27.77
200ng	26.61	26.85	26.73
300ng	26.11	25.30	25.71
500ng	25.30	25.26	25.28

核心性能特点

甲基化专用：热启动酶+优化缓冲液，适配甲基化检测场景
高耐受广适配：耐亚硫酸盐，兼容25~70% GC含量模板
高灵敏高准确：低拷贝检出能力强，扩增线性好，定量精准
操作简便：2×预混体系，仅需添加引物、探针、模板

货号规格与组分

JSR-E-206：100次反应，1mL装预混液
JSR-E-207：500次反应，5×1mL分装预混液
配套染料：随附50×ROX High/Low两种参比染料
储存条件：-25~-15℃ 冷冻避光保存

适用实验场景

甲基化检测：DNA甲基化位点定量检测
基因分型：SNP检测与等位基因分型
转化样本：亚硫酸盐转化DNA样本检测
低拷贝检测：微量甲基化模板灵敏检出

甲基化qPCR预混液高频FAQ

1：这款MethyPrecise® qPCR预混液是什么产品？核心优势是什么？

本产品是专为DNA甲基化检测优化的2×探针法qPCR预混液，采用基因工程改造热启动酶与专用缓冲体系，显著提升甲基化样本的检测性能。

1. 配方优化：由基因工程改造的热启动酶与优化的反应缓冲液配制而成，专门适配甲基化检测场景；

2. 耐受适配：亚硫酸盐耐受性强，兼容25~70% GC含量模板，具备良好的尿嘧啶耐受性与3'端错配碱基识别能力；

3. 性能优异：多重靶标灵敏度、特异性与低拷贝检出率大幅提高，扩增曲线线性优异，靶基因定量准确性高；

4. 操作便捷：2×预混体系，使用时只需额外加入引物、探针、模板，大幅减少加样步骤与误差。

2：产品有哪些货号规格？试剂盒包含哪些核心组分？

提供两种反应规模规格，预混液+双规格ROX参比染料套装，无需额外采购配套试剂。

1. 货号规格：
• JSR-E-206：100次反应规格，含1mL 2×预混液；
• JSR-E-207：500次反应规格，含5×1mL 2×预混液，方便分装使用；

2. 核心组分：
• 2×Methy-qPCR Mix：预混热启动DNA聚合酶、dNTP、优化缓冲体系等；
• 50×ROX High：高浓度参比染料；
• 50×ROX Low：低浓度参比染料。

配套提示：两种ROX随试剂盒附赠，可根据实验仪器型号选择使用。

3：产品的储存条件是什么？使用前有哪些注意事项？

规范储存与操作是保证酶活性与扩增稳定性的关键。

1. 储存条件：-25~-15℃冷冻、避光保存，产品自售出之日起提供1年质量保证；

2. 使用前准备：取出后置于冰上融化，完全融化后轻柔颠倒混匀，瞬时离心后再使用；

3. 上机要求：配制反应体系、盖好管盖后，瞬时离心PCR管，避免管内气泡干扰荧光信号采集；

4. 使用后处理：及时盖紧瓶盖，放回-20℃冷冻保存，避免试剂长时间暴露于室温。

重要提醒：避免反复冻融，反复冻融会导致酶活性下降，建议分装成单次用量保存。

4：标准qPCR反应体系如何配制？反应体系可以调整吗？

标准20μL反应体系，组分比例清晰，可在一定范围内按需调整。

1. 标准20μL反应体系：
• 2×Methy-qPCR Mix：10μL
• Forward Primer（10μM）：0.4μL
• Reverse Primer（10μM）：0.4μL
• Probe（10μM）：0.4μL
• Template DNA：按需添加（推荐2μL）
• 50×ROX（Low/High）：0.4μL
• ddH₂O：补至20μL

2. 体系调整：反应体系可在5~25μL范围按比例调整，不建议大于50μL；

3. 浓度优化：引物和探针终浓度可在0.1~1μM之间调整，以获得最佳扩增效果。

操作建议：共同组分先配成预混液再分装，减少加样误差，提升实验重复性。

5：高低两种ROX参比染料如何选择？分别适配哪些仪器？

ROX用于荧光信号基线校正，需根据qPCR仪器型号匹配选择，保证定量准确性。

1. ROX High：适配Applied Biosystems® 5700、7000、7300、7700、7900HT、StepOne™、StepOnePlus™等机型；

2. ROX Low：适配Applied Biosystems® 7500、ViiA™7、QuantStudio™ 12K Flex、Agilent Mx3000P™、Mx3005P™、Mx4000™等机型；

3. 无需ROX：适配Rotor-Gene™、Opticon™、Chromo4™、LightCycler®系列、Bio-Rad CFX96、Illumina Eco™等机型。

注意：ROX选择错误会导致基线异常、曲线不光滑，严重影响定量结果准确性。

6：这款预混液对模板有什么要求？GC含量兼容范围是多少？

专为甲基化样本优化，宽GC耐受、高亚硫酸盐耐受性，适配各类转化后DNA样本。

1. 适用模板：亚硫酸盐转化后的DNA样本、甲基化标准品、质粒模板、基因组DNA等；