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简石生物 通用DNA纯化回收试剂盒II(TD410)
产品概述
本产品为通用DNA纯化回收试剂盒II(货号TD410系列),采用离心柱法快速回收琼脂糖凝胶、PCR产物、酶切液中的DNA片段,全程仅需15分钟。采用1号C带盖纯化柱,最小洗脱体积≥10μL,实现高浓度洗脱;可回收100bp~23kb DNA片段,回收率高、产物纯度好。无需有机变性剂,操作安全简便。提供50次、200次两种包装规格,全组分室温储存,回收产物适用于DNA连接、测序、标记、PCR等实验,仅用于科研实验用途。
产品特点
- 快速回收流程,采用快速核酸结合技术,全程仅需15分钟即可完成DNA纯化回收,大幅缩短实验周期;
- 微量柱高浓度洗脱,1号C纯化柱最小洗脱体积≥10μL,DNA洗脱浓度高,适配下游微量反应需求;
- 宽片段范围适配,可回收100bp~23kb长度DNA片段,覆盖常规分子生物学实验主流片段大小;
- 高回收效率,100bp~10kb片段回收率70%~90%,11kb~23kb片段回收率50%~70%,样品损失少;
- 多样品来源兼容,支持琼脂糖凝胶切片、PCR产物、酶切反应液、质粒抽提产物等多种样品的DNA回收;
- 无有机试剂设计,无需氯仿、酚等有毒有机变性剂,操作安全,降低实验污染与健康风险;
- 高纯度产物,纯化DNA无盐、无杂质残留,A260/A230比值优异,适配测序、连接、酶切等精密下游实验;
- 两种包装规格,50次装适配小批量预实验,200次装适配实验室常规高通量使用;
- 全组分室温储存,无需低温冷链,降低储存与运输成本,实验室库存管理便捷;
- 配套完整操作指引与常见问题解决方案,新手易上手,便于快速排查实验问题。
简石生物 通用DNA纯化回收试剂盒II
琼脂糖凝胶/PCR产物DNA片段回收 高频问题FAQ
核心性能特点
- 快速回收:全程约15分钟,操作简便无需有机试剂
- 高浓洗脱:微量柱设计,最小洗脱体积≥10μL
- 纯度优异:可直接用于连接、测序、酶切、PCR等实验
- 样品兼容:凝胶回收、PCR产物、酶切产物均适用
货号规格与组分
- TD410-50:50次反应规格
- TD410-200:200次反应规格
- 核心组分:通用溶胶液、DNA洗涤液、DNA洗脱液、1号C纯化柱
- 储存条件:全组分室温密封保存
回收性能参数
- 片段范围:100bp ~ 23kb DNA片段
- 回收率:100bp~10kb为70~90%;11~23kb为50~70%
- 结合载量:单柱最大结合5μg DNA
- 离心力:1000~16000×g 通用离心条件
通用DNA纯化回收试剂盒II 高频FAQ
本试剂盒适配多种来源的DNA样品,回收片段覆盖宽,回收率稳定,无需有机试剂抽提。
1. 适用样品:可从琼脂糖凝胶、PCR反应液、限制性内切酶消化液、质粒抽提产物、激酶反应液等体系中回收纯化DNA;
2. 回收片段范围:可高效回收100bp ~ 23kb长度的DNA片段;
3. 回收率表现:100bp ~ 10kb片段回收率为70~90%;11kb ~ 23kb大片段回收率为50~70%;
4. 产物纯度:回收的DNA纯度高,可直接用于DNA连接、测序、标记、PCR、酶切等下游分子生物学实验。
洗涤液使用前必须加入无水乙醇,这是保证洗涤效果与DNA纯度的关键步骤。
1. 配制比例:50次反应规格:6mL DNA洗涤液中加入24mL 100%无水乙醇(或26mL 95%乙醇);200次反应规格:24mL DNA洗涤液中加入96mL 100%无水乙醇(或104mL 95%乙醇);
2. 标记提示:加入乙醇后请在试剂瓶上做好标记,避免重复添加或遗漏;
3. 储存要求:配制完成后室温密封保存,每次使用后拧紧瓶盖,防止乙醇挥发导致洗涤效果下降;
4. 失效判断:乙醇挥发后洗涤效果会显著下降,若出现洗涤后盐残留、纯度偏低,需检查乙醇含量并及时补加。
规范溶胶、上样、洗脱操作是保证回收率的核心,大片段需额外优化洗脱条件:
1. 凝胶切取:切胶时尽量切去多余空白凝胶,减少溶胶液体积,避免样品过度稀释;
2. 凝胶溶解:按1:3比例加入通用溶胶液,55℃水浴10分钟至凝胶完全溶解,期间温和混匀;溶解温度不超过60℃,避免DNA变性;
3. 上样离心:纯化柱单次最大上样800μL,体积过大需分多次上样离心;
4. 大片段优化(>10kb):洗脱液提前60~70℃预热,滴加至柱基质后静置2分钟再离心,可显著提升大片段回收率;也可进行二次洗脱提高产量。
A260/A230偏低核心为盐或乙醇残留,规范洗涤与离心操作即可有效改善。
1. 常见原因:纯化柱尖端接触收集管底部废液,造成盐污染;洗涤液中乙醇挥发不足,乙醇残留;凝胶溶解不完全,微小琼脂糖颗粒混入洗脱液;
2. 解决方法:取出纯化柱时避免尖端触碰管底废液;洗涤后增加一步空柱离心2分钟,彻底甩干残留洗涤液;确保凝胶完全溶解后再上柱;
3. 预防措施:洗涤液密封保存,定期补充乙醇;严格按照操作步骤进行两次洗涤,保证杂质去除充分。
可根据下游实验需求选择洗脱液,优化洗脱条件可提升核酸浓度与回收率:
1. 洗脱液选择:可以用超纯水洗脱,但需保证pH>6.0,pH过低会降低洗脱效率;也可使用TE缓冲液(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH8.0)洗脱,适合DNA长期保存;
2. 最小洗脱体积:1号C纯化柱最小洗脱体积≥10μL,常规使用10~15μL洗脱液,可获得高浓度DNA;
3. 提升浓度技巧:将第一次洗脱液重新加回纯化柱进行二次洗脱,可提高DNA回收率;预热洗脱液、延长静置时间,均可提升洗脱效率;
4. 注意事项:若下游实验对EDTA敏感(如测序、部分酶切反应),优先使用无EDTA的洗脱液或超纯水洗脱。
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