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简石生物 DNase I (RNase-free) （重组脱氧核糖核酸酶I）
产品概述
本产品为重组DNase I（RNase-free），由大肠杆菌重组表达生产，核心优势如下：※高效降解DNA，适配RNA纯化、RT-PCR/qPCR前处理；※可按需产生随机剪切或双链平齐/短突出末端，灵活应用于不同实验场景；※酶活稳定可控，重复性好，保证实验结果的一致性；※操作简单温和，冰上使用、高温EDTA快速灭活，实验流程简便安全；※高纯度重组表达，无RNase污染，确保RNA完整性；※严格质控，每批次均经过活性检测及纯度验证。产品货号为JSR-E-1010-A，仅用于科研实验（RUO），不可用于临床诊断。
产品特点
- ※高效DNA降解：重组DNase I可高效消化单链或双链DNA，适用于RNA样品中基因组DNA的彻底去除，保障下游实验准确性；
- ※酶活稳定可控：酶活定义明确（Kunitz单位），活性稳定，批间差小，确保实验重复性；
- ※操作简便安全：酶液冰上操作，70°C加热或加入EDTA即可快速灭活，无需复杂纯化步骤；
- ※高纯度无RNase污染：重组表达并经严格纯化，无RNase残留，保护RNA样本不被降解；
- ※配套缓冲液与稀释液：随产品提供10×反应缓冲液及专用稀释液，方便精确配制工作液；
- ※严格质控体系：每批次产品均经活性、纯度及RNase残留检测，附质检报告；
- ※长期稳定保存：-25~-15°C避光保存，有效期长达1年；建议分装储存，避免反复冻融；
- ※适用多种下游实验：广泛用于RNA纯化、RT-PCR、qPCR、cDNA合成前的DNA去除，以及DNA片段化处理等；
DNase I (RNase-free) 技术参数明细
| 产品信息 | 规格/参数 |
|---|---|
| 产品货号 | JSR-E-1010-A |
| 产品组分 | DNase I (RNase-free) - 10 U/μL (100 μL) DNase I 反应缓冲液 (10×) (1 mL) DNase I (RNase-free) 稀释液 (500 μL) |
| 酶活定义 | 1 Kunitz单位：以 小牛胸腺DNA为底物，25°C、pH5.0条件下，1 min内使反应液260 nm吸光度增加0.001所需的酶量 |
| 推荐使用浓度 | 建议将10 U/μL 原液稀释至 2 U/μL 后使用 |
| 保存条件 | -25 ~ -15°C 避光保存，有效期2年 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
| 用途 | 仅用于科研实验（RUO） |
简石生物 DNase I (RNase‑free) 重组脱氧核糖核酸酶 I
高效降解 DNA · 适配 RNA 纯化 / RT‑PCR / qPCR 前处理 · 操作简单温和
产品基本信息
- 货号：JSR‑E‑1010‑A
- 来源：大肠杆菌重组表达
- 酶活定义：Kunitz 单位（25°C，pH5.0）
- 浓度：10 U/μL（推荐稀释至 2 U/μL 使用）
保存与运输
- 保存条件：‑25 ~ ‑15°C 避光保存
- 有效期：1 年（建议分装，避免反复冻融）
- 运输方式：干冰运输
- 操作注意：冰上使用，禁止剧烈振荡
产品组分（试剂盒）
- DNase I (RNase‑free) 10 U/μL：100 μL
- DNase I 反应缓冲液 (10×)：1 mL
- DNase I (RNase‑free) 稀释液：500 μL
- 用途：仅用于科研实验（RUO）
DNase I (RNase‑free) 高频 FAQ
重组 DNase I 可高效降解单链或双链 DNA，特别适用于 RNA 纯化过程中去除基因组 DNA 污染，以及 RT‑PCR / qPCR 前处理。也可用于 DNA 片段化、产生特定末端结构的分子生物学实验。
• 典型应用：RNA 样品中残留 DNA 的消化、DNase I 足迹法、DNA 随机片段化、制备平末端或粘末端 DNA 片段。
• 因不含 RNase，可放心用于 RNA 相关实验，不会降解 RNA。
1 Kunitz 单位定义为：以小牛胸腺 DNA 为底物，在 25°C、pH5.0 条件下，每分钟使反应液在 260 nm 处吸光度增加 0.001 所需的酶量。
• 本产品出厂浓度为 10 U/μL，推荐使用前用配套稀释液稀释至 2 U/μL 工作液。
• 活性定义清晰，便于准确计算用量，保证实验重复性。
• 未开封：‑25 ~ ‑15°C 避光保存，有效期 1 年。
• 开封后：建议立即分装成单次用量（例如 10 μL/管），置于‑25 ~ ‑15°C 保存，避免反复冻融。分装后可稳定保存至原有效期结束。
• 运输采用干冰，收货后请第一时间转入‑20°C 冰箱。
推荐使用试剂盒中提供的 DNase I (RNase‑free) 稀释液 将原液（10 U/μL）稀释至 2 U/μL。例如：取 10 μL 原液 + 40 μL 稀释液，轻轻颠倒混匀，冰上放置备用。
• 操作全程在冰上进行，禁止涡旋或剧烈振荡。
• 典型反应体系：1 μg RNA 样品中加入 1 μL 2 U/μL 的 DNase I，37°C 孵育 15–30 分钟。
• 稀释后的工作液应在当日使用完毕，不可再次冷冻。
• DNase I 的活性依赖于二价金属离子。反应缓冲液（10×）已包含最佳浓度的 MgCl₂ 和 CaCl₂。
• 在 Mg²⁺ 存在时，DNase I 可随机剪切双链 DNA 任意位点，产生带 5'‑P 和 3'‑OH 的寡核苷酸。
• 在 Mn²⁺ 存在时，DNase I 在同一位点切断 DNA 双链，产生平末端或带有 1–2 个核苷酸突出的粘末端。
本产品提供两种简便灭活方式：① 加热灭活：70°C 孵育 10 分钟；② EDTA 螯合灭活：加入 EDTA 至终浓度 5 mM，室温孵育 5 分钟。
• 加热灭活后可直接用于 RT‑PCR 或 qPCR，无需额外纯化。
• EDTA 灭活适用于后续需要保持低温的操作，灭活后产物可短期冰上保存。
• 若使用 EDTA 灭活，注意后续反应体系中 EDTA 浓度不应过高（通常 ≤ 1 mM），以免抑制聚合酶。
产品名称为“DNase I (RNase‑free)”，经严格质控确认无 RNase 残留，不会降解 RNA。每批次均通过 RNase 活性检测（RNA 琼脂糖凝胶电泳法），确保 RNA 在消化过程中保持完整。
• 操作时仍需佩戴手套、使用无 RNase 耗材，并避免唾液、皮肤等外源 RNase 污染。
• 配套的稀释液和缓冲液也经过 DEPC 处理或 RNase 灭活处理。
• 大多数情况下不需要。灭活后的 DNase I 及其缓冲成分不会抑制反转录酶或 Taq 聚合酶。
• 但如果后续实验对离子强度、EDTA 浓度非常敏感（例如某些一步法 RT‑qPCR），建议使用柱纯化或乙醇沉淀去除蛋白质和盐离子。
• 对于常规两步法 RT‑qPCR，直接取 1–5 μL 灭活后的反应液作为模板即可。
可以。通过改变缓冲液中的二价阳离子可实现：
• Mg²⁺ → 随机剪切，产生 5'‑P 和 3'‑OH 的寡核苷酸混合物（非特异性末端）；
• Mn²⁺ → 在同一位置切断双链，产生平末端或 1–2 nt 突出的粘末端。
• 如需平末端，推荐使用含 MnCl₂ 的反应体系（例如 50 mM Tris‑HCl pH7.5, 10 mM MnCl₂, 100 μg/mL BSA）。
• 产生的粘末端可直接用于连接反应（如 T4 DNA 连接酶）。
试剂盒包含：
- DNase I (RNase‑free) – 10 U/μL，100 μL
- DNase I 反应缓冲液 (10×)，1 mL
- DNase I (RNase‑free) 稀释液，500 μL
• 用户只需准备待处理的 DNA/RNA 样品、无 RNase 的水、PCR 管或离心管。
• 若需进行 Mn²⁺ 条件下的特殊剪切，需自行准备 MnCl₂ 溶液（例如 1 M MnCl₂）。
• 所有试剂仅供科研使用，不可用于人体或临床诊断。
JSR-E-1010-A
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