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一步法荧光定量PCR试剂盒：定量快速车道，精准荧光导航！

发布时间：

2024-12-06

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

 

一步法荧光定量PCR试剂盒【JSR-E-601】
 
 
 
01
 
实时荧光定量PCR
 

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

 

02
 
定量逆转录PCR
 

定量逆转录PCR（quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR）是应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法。在该方法中，总RNA或信使RNA（mRNA）首先通过逆转录酶转录成互补DNA（cDNA）。随后，以cDNA为模板进行qPCR反应。RT-qPCR已被用于多种分子生物学的应用中，其中包括基因表达分析、RNA干扰验证、微阵列验证、病原体检测、基因测试和疾病研究。

 

 
RT-qPCR的一步法与两步法
一步法与两步法
 
 
 
 
 

RT-qPCR可通过一步法或两步法来完成。一步法RT-qPCR把逆转录与PCR扩增结合在一起，使逆转录酶与DNA聚合酶在同一管内同样缓冲液条件下完成反应。一步法RT-qPCR只需要利用序列特异性引物。在两步法RT-qPCR中，逆转录和PCR扩增过程是在两个管中完成，使用不同的优化的缓冲液、反应条件、以及引物设计策略。

 

图片1.png

 
一步法&两步法的优缺点
 
 
  优点 缺点
一步法

1、由于两步反应都在一个管中完成，因此该方法具有更少的实验误差

2、更少的移液步骤能够减少污染的风险

3、适用于高通量扩增/筛选，快速且可重现性高

1、无法分别对两步反应进行优化

2.由于反应条件是结合两步反应折衷得到的，因此灵敏性不如两步法

3、单一样品检测的靶点数较少
两步法

1、能够建立可以长期保存，并用于多次反应的稳定的CDNA库

2、靶基因和内参基因能够从同一个cDNA库进行扩增而不需要多重cDNA库

3、能够优化单一反应过程的反应缓冲液和反应条件

4、灵活的引发条件选择

1、使用多个试管，以及更多的移液步骤会增加DNA污染的风险,并且耗时。

2、相较于一步法，需要进行更多的优化
 
 

简石生物一步荧光定量PCR试剂盒·产品特点

 
 
产品特点>>
 
01

高检测灵敏度：可检测到个位数拷贝的模板或 0.1pg 的总 RNA。

02

多重检测：支持多重探针检测。

03

抗污染体系：使用的是 dUTP/UNG 防污染体系，不含 dTTP，能有效消除扩增产物的污染。

主要用途
 

本产品适用于人源、病毒、细菌 RNA 或者体外转录 RNA 等的定量或定性检测。

 
01
数据对比

图片2.png

图片3.png

使用简石生物一步法RT-qPCR试剂与厂家A及厂家B的RT-qPCR试剂进行对比：底物模板分别为RNA及cDNA，相同底物模板情况下，简石试剂Cq值最小，且误差值最低，证明简石RT-qPCR试剂性能最优，且稳定性最好可重复最高！

02
浓度检测

针

图片4.png

企业微信截图_20241125163528.png

企业微信截图_20241125163528.png

使用简石一步法RT-qPCR试剂对不同浓度RNA底物模板进行检测，结果表明：简石试剂可对低至0.01ng/μl的RNA模板进行检出，具有及高的检测灵敏度，可适用于各种低载量RNA病毒的检测，更符合目前的病毒检测试剂盒要求。

03
核酸释放剂- R1400 & JSM140

【预期用途】

用于唾液、口腔、鼻腔不集后的样本的预处理，使样本中的核酸(DNA 和RNA)释放出来。以便于使用体外诊断试剂或仪器对待测物进行检测。

【检测原理】

核酸释放剂可以快速破坏蛋白结构，并清除样本中的核酸酶，保证核酸的有效释放。

 

无需提取，可直接进行检测！

 

 
扫描二维码 领取试用装
简石生物
货号：JSR-E-601&602
 

 

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一刻钟！轻松搞定质粒DNA提取！

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